长时(shí)间的仿生栽(zāi)培(péi)和生态(tài)研究,使得羊肚(dù)菌的(de)发生规律(lǜ)和生(shēng)理需求逐渐为人们所(suǒ)掌握(wò)。一些羊肚菌爱好(hǎo)者和(hé)科技工作(zuò)者(zhě)开始意识到菌种在羊肚菌驯化栽培中的(de)重要性。这是从仿生栽培向人工(gōng)栽培的重要转变。
菌(jun1)种的驯(xùn)化选育、补料技(jì)术(shù)和人(rén)为(wéi)刺激诱发出菇(gū)是(shì)羊肚菌人工栽培区别于仿生栽培的重要标志。
实际上,20世纪80年(nián)代,美国科学家Ower就模拟自然环(huán)境在(zài)实验(yàn)室内成功实现了羊肚菌出菇[33~36],随后由(yóu)其合作者Mills进行了相对成功的工厂化栽培应用[4]。
无(wú)论是民(mín)间还(hái)是官方资料都显示,我国的羊肚菌人工栽培技术都明(míng)显晚于Ower的(de)技术专(zhuān)利。
蔡知(zhī)桂等在2010年公布了一种羊(yáng)肚菌栽培技(jì)术(shù)专利[37],技术流程依次(cì)为栽(zāi)培种(zhǒng)的制作、培养料(liào)的制备、播种、发菌管理及出菇管理等。值(zhí)得注意(yì)的是,该专利(lì)要求在菌丝成熟之前至少进行(háng)一(yī)次(cì)营养液补充,这(zhè)可(kě)以认为是羊肚(dù)菌仿(fǎng)生栽培向纯人工栽培的过渡(dù)。赵琪等公(gōng)布了(le)一种梯(tī)棱(léng)羊肚菌(jun1)栽(zāi)培方(fāng)案(àn)和菌种制作方(fāng)案的专(zhuān)利技术,首次(cì)提及所(suǒ)用的菌种是经(jīng)过分子鉴(jiàn)定的梯(tī)棱(léng)羊(yáng)肚菌(M.importuna)[38,39]。
2.1 菌种的选择
羊肚菌(jun1)子囊果(guǒ)具有明显的(de)形态可塑(sù)性(xìng),因此其物种的鉴定一直是一个难题。早期对
羊肚菌菌种的选择(zé)和确定大多根据形态特征,保留下来的模式标本和数据资料有限,因此(cǐ),很难推定早期资料中的所用品种和现(xiàn)代分类系统的对应关系。近年来,应用(yòng)分(fèn)子系统发育学鉴定(dìng)羊肚菌物种得到广泛的认可[40~43]。王波和鲜灵对四(sì)川大(dà)邑县、崇(chóng)州市、郫县和涪城区的人工栽培品种(zhǒng)进行形态(tài)特征的详细描述和(hé)分子(zǐ)鉴定(dìng),结果(guǒ)发现,所有羊肚菌品种的ITS-DNA序列与数据库中(zhōng)梯棱羊(yáng)肚菌相似度达100%,而与羊肚(dù)菌属的其他物种(zhǒng)相差(chà)甚(shèn)远[44]。赵琪等(děng)在公开(kāi)的羊肚菌栽培专利中指出,所用的品(pǐn)种为梯棱羊肚菌(jun1)[38,39]。
自2012年(nián)起,我们在(zài)全(quán)国各地进(jìn)行羊肚菌的驯化栽培和标(biāo)本(běn)采集整理工作,随后对来源清晰的4个商业推广菌株羊肚菌1号(hào)、3号、6号和(hé)7号进行(háng)了详细的形(xíng)态特征记录和DNA序列分(fèn)子鉴(jiàn)定分析。结果表明,羊肚菌1号和(hé)3号是梯棱羊(yáng)肚(dù)菌,6号为(wéi)六妹羊肚菌(M.
sextelata),7号为七妹羊肚菌(M.septimelata),均属(shǔ)于(yú)黑色(sè)羊肚菌支系[43]。其他品种是否(fǒu)可(kě)用于驯化栽培有(yǒu)待进行深入研(yán)究(jiū),建议生(shēng)产者在开展羊肚菌人(rén)工栽培时,应定向采集当前已经应用的品种,经初(chū)筛、小(xiǎo)试和中试后,再进(jìn)行大面积的示范性栽培和推广。
2.2 补料技术
在有目的有意(yì)识驯(xùn)化菌种的基础上,“外源营养袋(dài)”的出现和广泛使用促进了羊肚(dù)菌产业的健康发展(zhǎn),外(wài)源(yuán)营养袋技术(shù)是羊肚菌生(shēng)产环(huán)节中的最重要技术(shù)处理,是羊(yáng)肚菌丰产的最重要“能量”支撑(chēng)。
Ower曾详细论述外(wài)源营(yíng)养(yǎng)袋的技术原理和制作工艺,但在随后的推广应用中,并未被重视和使用(注:Ower于1986年(nián)逝世,后期(qī)的推广由合作(zuò)者Mills进行)。Ower对其原理和(hé)适用(yòng)方法的解释是(shì)羊肚菌需要(yào)在(zài)营养相对贫(pín)乏(fá)的环境中才(cái)能(néng)进行(háng)有性生殖,而其菌丝自身储备的能量不足以支撑其有性生殖过程(chéng),因此需(xū)要从外界吸(xī)收新(xīn)的营养物质,同时需要(yào)在(zài)生产(chǎn)后期对新的营养物(wù)质予以移(yí)除(chú),以使(shǐ)菌丝重新(xīn)回(huí)到营养贫乏状态转而进(jìn)行有性生殖。Ower利用培(péi)养菌核的培养料作为“外源性(xìng)营养物”进行补料操作(zuò)[34~36]。
我国(guó)谭方河先生最早使用外源营养袋(dài)技(jì)术[4]。约2000年前(qián)后,出于“不(bú)同(tóng)菌(jun1)丝的配合”(不(bú)同“极性”的菌丝杂合)可能有助于出菇的认识,在(zài)菌丝萌(méng)发后,他采取在菌(jun1)床上扣上接种(zhǒng)有另一类型(xíng)羊肚菌菌种的(de)菌袋(dài),以实现两种菌丝的融合,诱发出(chū)菇,此方法比不“杂交”具有明显的(de)增产效果,该技(jì)术在(zài)早(zǎo)期曾被称为“菌(jun1)丝融合(hé)技术”。随后,谭方河先(xiān)生(shēng)又(yòu)发(fā)现,只扣料袋(不接种(zhǒng))同样可以促进增产(chǎn),因此就推(tuī)翻了“菌丝(sī)融合的说法”,进而发展(zhǎn)成为现今(jīn)的(de)外源(yuán)营养袋技术。
2.3 保育催(cuī)菇(gū)
催菇是(shì)羊(yáng)肚菌(jun1)栽(zāi)培(péi)的重要环节,技术性较强,其目的是创造不利于羊肚菌(jun1)继续营养生长的条件,使(shǐ)其转向生(shēng)殖生长,其(qí)中包(bāo)括营养(yǎng)、水分(fèn)、湿度、温度、光线等刺激。
①营养刺激是(shì)指通过(guò)移(yí)除营养实(shí)现(xiàn)营养刺激(jī),该(gāi)技术也是Ower专利(lì)中强调(diào)的环节,可行的操作是(shì),外源(yuán)营养袋(dài)施放(fàng)后(hòu)20~25天(tiān)移除外(wài)源营养袋[34~36]。
②水分刺激是自然界大型真菌出菇的重要条件。水分可(kě)冲刷真菌分泌(mì)的各种(zhǒng)酶类物质,改变菌丝渗(shèn)透压,也(yě)是菌丝转向生殖生(shēng)长所需要湿润(rùn)环境的重(chóng)要保证。具(jù)体做法是:撤袋之后,大水浇灌,至地面完全湿透[1]。
③湿度控制包括(kuò)土壤含水量和(hé)空气相对湿度,水(shuǐ)分刺(cì)激使(shǐ)土壤含水量达到饱和(hé),随后控制土壤水分在20%~30%,原(yuán)基发(fā)生前空气(qì)湿(shī)度在85%~95% [1]。
④目前没有数据直接支(zhī)持温差刺激实现羊肚(dù)菌的生殖(zhí)生长,但大量数据表明,10 ℃左右的昼夜温(wēn)差,有助于羊肚菌出菇。主要通过(guò)白天闭(bì)棚增温,晚间掀开棚通风降温以加(jiā)大温差[1]。
⑤栽培经验表明,光线也是影响(xiǎng)出菇的一个重要指标,过(guò)强(qiáng)会抑制出菇,可行的(de)操作是(shì)使用(yòng)4~6针的(de)遮(zhē)阳网进行遮阴(yīn)处理。